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Ventajas del sistema de expresión de proteínas sin células

Tiempo de actualizacion : 2021-01-12

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Puntos de vista : 48

Ventajas del sistema de expresión de proteínas sin células

En comparación con la expresión de proteínas basada en células, los sistemas de expresión de proteínas libres de células tienen varias ventajas distintas, incluida una mayor producción general de proteínas funcionales y solubles de longitud completa, y un ahorro de tiempo significativo. Un método típico in vivo puede tardar algunos días o incluso el peor tiempo en completarse. En marcado contraste, la reacción de traducción in vitro, incluido el tiempo que se tarda en preparar el extracto, se puede completar en unas pocas horas, proporcionando así el mejor vínculo entre el fenotipo (función de la proteína expresada) y el genotipo. Manera rápida.


Utilizando un método sin células, la síntesis de proteínas también es universal porque se puede realizar utilizando múltiples entradas. Los sistemas de traducción sin células utilizan ARNm como plantilla, mientras que el ADN plasmídico o los fragmentos de PCR lineal pueden actuar como plantillas de ADN en un sistema de transcripción / traducción acoplado.

Advantages of cell-free protein expression system


Otra ventaja de CFPS es que es una respuesta abierta. Dado que la expresión de proteínas libres de células no está restringida por la pared celular, existen muchas oportunidades para controlar directamente el entorno químico, lo que permite la adición de componentes y moléculas externos, creando así condiciones que son más propicias para el plegamiento y la actividad de las proteínas. El formato CFPS permite un seguimiento activo, un muestreo rápido y un cribado sin necesidad de pasos de clonación de genes.


Dado que no existen barreras celulares que puedan limitar el control de la traducción, el sistema CFPS también es un método ideal para sintetizar proteínas, que tradicionalmente son difíciles de expresar y analizar posteriormente.


Cuando no existe un metabolismo celular interno o vías bioquímicas para contrarrestar, las proteínas de membrana, las proteínas virales, las proteínas tóxicas y las proteínas que experimentan una rápida degradación proteolítica a través de procesos intracelulares también pueden expresarse más fácilmente. Por lo tanto, se alivian las preocupaciones sobre la posible toxicidad de la proteína del producto.


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